İçeriği Paylaş:

Analiz Tipine Göre Kullanılması gereken Substrat Miktarı

Analiz Tipine Göre Kullanılması gereken Substrat MiktarıGıda içerisindeki bir enzimin miktarının belirlenmesi isteniyorsa:

  • Enzim aktivitesini belrileyen (sınırlayan) faktörün mevcut substrat miktarı değil de enzim miktarı olduğunu garantilemek için yüksek substrat derişimlerinde çalışılır.
  • Bu da substrat derişiminin enzimin Vmax’te çalıştığını garantileyecek kadar yüksek olmasını
  • Pratikte bu şart, ortamdaki substrat derişiminin belirlenen Km değerinden 10- 20 kat fazla olmasının ağlanması ile gerçekleştirilir.
  • Bu durumda enzim aktivitesi enzim miktarı ile doğru orantılı artacaktır.1Enzim gıda içerisindeki bir substrat derişiminin belirlenmesinde kullanılacaksa (örneğin gıda içerisindeki glikoz miktarının glikoz oksidaz aktivitesi ile belirlenmesi):
    • Bu durumda substratın sınırlayıcı faktör yani enzim aktivitesini belirleyici faktör olması
    • Substrat konsantrasyonu Km’den düşük olmalıdır ki substrat konstantrasyonu artışı ile birlikte belirgin bir enzim aktivitesi artışı da olsun.1Enzimatik Tepkimelerin Hızına Etki Eden Faktörler
      1. Diğer Faktörler
      • Aktivatörler
      • İnhibitörler

      Aktivatörler

      • Kofaktör ve koenzimler: Daha önce üzerinde

      duruldu.

    • İnhibitörler (Engelleyiciler)
      • Bir enzimin katalitik aktivitesini azaltan

      maddelerdir.

      • İki tip inhibisyon (engelleme) vardır:
      • Geri dönüşümlü
      • Geri dönüşümsüz
    • Geri Dönüşümlü İnhibisyon
      • Yarışmalı (kompetetif) inhibisyon
      • Yarışmasız (nonkompetetif) inhibisyon
      • Sınırlı yarışmalı (Ankompetetif) inhibisyon

Yarışmalı Kompetitif İnhibisyon 

  • Kompetitif enzim inhibisyonunda, bir kompetitif inhibitör, enzimin aktif yeri için substrat ile yarışır.
  • Kompetitif inhibitör, sıklıkla yapısal olarak substrata benzeyen ve substrat gibi, enzime geri dönüşümlü bağlanma özelliği gösteren bir bileşiktir.
  • Enzimin aktif yerine inhibitör bağlanınca reaksiyon gerçekleşmez; inhibitör aktif yeri işgal ederken substratın enzime bağlanmasını önler.
  • Substrat derişimi arttırılırsa inhibitör

etkisi azaltılabilir.1

  • Km değeri üzerine belirgin etki ve Vmax değeri üzerine etkinin olmayışı, kompetitif enzim inhibisyonunun karakteristiğidir:
  • Kompetitif enzim inhibisyonunda inhibitör madde, enzimin substratına olan ilgisini azaltır; Km değeri büyür.
  • Kompetitif inhibitör, Lineweaver-Burk grafiğinin eğimini arttırır.1

Yarışmasız Nonkompetitif İnhibisyon 

  • Nonkompetitif inhibitör, kimyasal yapı yönünden substrata
  • Nonkompetitif inhibitör, enzim üzerinde substratın bağlandığı aktif yerden ayrı bir yere geri dönüşümlü olarak bağlanır.
  • Enzime nonkompetitif inhibitörün bağlanması substrat bağlanmasını bloke etmez, substrat bağlanması da nonkompetitif inhibitörün bağlanmasını bloke
  • EI ve ESI ürüne dönüşmez.
  • Substrat eklenmesi inhibisyon etkisini azaltmaz.1
    • ESI kompleksi ürün vermek üzere ES kompleksinden daha yavaş parçalandığı

    için tepkimenin hızı yavaşlamaktadır.

    • Bu tür inhibisyon ile, tepkimenin Vmax değeri azaldığı halde Km değeri değişmez.
    • Km değişmez çünkü enzimin substrata ilgisi değişmez.1

 Ankompetitif İnhibisyon

  • Ankompetitif inhibitör, nonkompetitif inhibitör gibi, enzim üzerinde substratın bağlandığı aktif yerden ayrı bir yere bağlanır;
  • Fakat nonkompetitif inhibitör serbest enzime veya ES kompleksine bağlanabildiği halde ankompetitif inhibitör, yalnızca ES kompleksi oluştuktan sonra enzimin substratın bağlı olduğu aktif yerden başka bir yerine bağlanarak enzimi inaktive
  • Substrat miktarının arttırılması inhibisyon etkisini arttırır.1
    • Ankompetitif inhibitör, ES konsantrasyonunu azaltır.
    • Ankompetitif inhibisyon sonucu hem Vmax hem Km değeri değişmektedir; Vmax değeri azalırken Km değeri küçülür:

    1

İçeriği Paylaş:
İlginizi Çekebilir
Yorum Yapılmamış

Henüz Hiç Yorum Yapılmadı..

Yorum Yaz

Analiz Tipine Göre Kullanılması gereken Substrat Miktarı

Biyoteknoloji

3/10/2016 | Yorum Yok | 104 | Mustafa Küçükakarsu